江北的平静并未持续太久。正如朱慈烺所预料，清廷摄政王多尔衮无法容忍南明继续巩固江淮防线，严令多铎必须有所行动，挽回颜面。多铎在得到部分增援，并调整策略后，于弘光元年十二月，再次发动了大规模进攻。
这一次，多铎吸取了强攻徐州失利的教训，将主攻方向放在了相对孤立，且战略意义同样重大的庐州（合肥）！他亲率主力大军六万，对外依旧号称十万，以蒙古骑兵为先锋，汉军旗绿营兵为主力，携带大量攻城器械，自淮安、寿州方向，浩浩荡荡扑向庐州。同时，他命令驻守颍州、亳州方向的清军偏师，向南佯动，牵制安庆的秦良玉本部，使其不能全力支援庐州。
庐州城下，战云密布。宁国公、太傅秦良玉白发苍苍，却精神矍铄，亲自坐镇城头。其子，安庆侯马祥麟顶盔贯甲，立于母亲身侧，神情肃穆。城内守军除了秦良玉带来的部分白杆兵精锐，更多的是近期整编的淮西团练和新募士兵，虽士气尚可，但实战经验有所欠缺。
“母亲，鞑子来势汹汹，看来是憋着一股劲要拿下庐州。”马祥麟望着城外漫山遍野的清军营寨，沉声道。
秦良玉目光如电，扫过清军的阵型，冷静分析：“多铎学乖了，没有直接蚁附攻城。你看，他们正在构筑炮位，挖掘壕沟，这是要长期围困，并用火炮削弱我们。”
果然，清军并未急于进攻，而是首先动用数百门大小火炮（包括缴获明军的旧式火炮和自造的红衣大炮），对庐州城墙进行了持续不断的猛烈轰击。炮弹呼啸着砸在城墙上，砖石飞溅，城楼受损，守军伤亡开始出现。
“命令炮营，测算敌炮位置，用‘弘光四式’进行压制射击！专打他们的炮阵和人员密集处！”秦良玉果断下令。
庐州城头，数量不多但射程精度远超清军的“弘光四式”长重炮发出了怒吼。沉重的炮弹划破长空，精准地落在清军炮兵阵地上，顿时人仰炮翻，清军的炮火为之一窒。
多铎在远处观战，见状又惊又怒：“伪明的火炮，果然刁钻！命令步骑，准备攻城！用楯车，掩护弓箭手和填壕队上前！”
激烈的攻防战就此展开。清军以楯车为掩护，冒着城头不断落下的炮火和箭矢，拼命填平护城河，架设云梯。守军则在秦良玉和马祥麟的指挥下，依托加固后的城防工事，用火铳、弓箭、滚木礌石乃至煮沸的金汁，顽强地阻击着攀城的清军。城上城下，杀声震天，尸横遍野。
战斗最激烈时，清军一度凭借人数优势，在数个地段同时登城，与守军展开了惨烈的白刃战。马祥麟亲自率领亲兵队四处救火，哪里危急就冲向哪里，手中长枪如同毒龙出洞，接连挑杀数名清军悍卒，稳住了阵脚。
秦良玉则坐镇中枢，不断调派预备队，协调各方，她的镇定自若，极大地鼓舞了守军的士气。
然而，清军毕竟兵力占优，且多铎不顾伤亡，持续投入生力军。连番血战之下，守军伤亡逐渐增加，箭矢、火药用度巨大，局面开始变得艰难。
“国公爷！东门缺口，鞑子又上来了！弟兄们快顶不住了！”一名浑身浴血的校尉踉跄跑来报告。
秦良玉霍然起身，抓起靠在墙边的白杆长枪，对马祥麟道：“麟儿，你在此督战，为娘去东门！”
“母亲！”马祥麟急道。
“执行军令！”秦良玉语气不容置疑，白发在硝烟中飞扬，身影虽略显佝偻，却如山岳般坚定。她知道，庐州绝不能丢，这不仅关乎淮西防线的稳定，更关乎帝乡凤阳的安危，关乎整个南明政权的士气！
就在庐州激战正酣之时，一匹快马冲破重重关卡，将求援急报送到了南京兵部衙门。史可法接到军报，不敢怠慢，立刻进宫禀报。
朱慈烺看着军报上“庐州危急，乞援”的字样，眼神瞬间变得冰冷锐利。
“传旨！”他斩钉截铁地下令，“命扬州黄得功，即刻抽调精兵一万，火速西进，驰援庐州！告诉他，不惜一切代价，务必解庐州之围！命徐州高杰、刘宗敏，加大出击力度，牵制当面清军，使其不能分兵南下！再命张煌言靖海营，寻机袭扰清军沿海补给线！”
一道道命令从南京发出，整个南明的战争机器再次高速运转起来。庐州，这座刚刚光复不久的帝乡屏障，迎来了南渡以来最严峻的一次考验。朱慈烺能否再次力挽狂澜？江北战局，又将走向何方？